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HPLC分析中，堿性化合物的拖尾現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生，而且堿性越強(qiáng)，拖尾發(fā)生的頻率越大。本期文章將分別探討造成堿性化合物拖尾的原因，并尋求相應(yīng)的解決方案。

固定相、流動(dòng)相、目標(biāo)分析物是HPLC分析的3個(gè)基本的要素。堿性化合物的拖尾現(xiàn)象，與這三個(gè)要素息息相關(guān)，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出在非理性狀態(tài)，都會(huì)導(dǎo)致拖尾現(xiàn)象出現(xiàn)。

導(dǎo)致堿性化合物拖尾的原因

由于C18碳鏈較長(zhǎng)，空間位阻大的原因，導(dǎo)致鍵合率不高，殘留大量未被鍵合的硅羥基，硅羥基解離。

硅膠鍵合相容易溶解在堿性介質(zhì)中，因此，大多數(shù)的反相HPLC方法都是在酸性或中性流動(dòng)相條件下分析，堿性化合物在這種條件下，由于解離平衡的關(guān)系，便會(huì)以離子形式存在，帶正電荷，堿性越強(qiáng)，解離越容易。

由于游離的硅羥基與解離后堿性化合物產(chǎn)生的二級(jí)作用，導(dǎo)致堿性化合物出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。

拖尾解決方案

1、固定相的選擇

堿性化合物分析，選擇硅羥基活性的鍵合相是獲得良好峰形的關(guān)鍵。

全多孔色譜柱有A型硅膠和B型硅膠兩種。A型硅膠鍵合相，金屬殘留量較多，鍵合率較低，金屬離子的存在也會(huì)增強(qiáng)硅羥基的活度，使游離的硅羥基更容易解離。因此，分析堿性化合物時(shí)要避免使用A型硅膠色譜柱。相反，B型硅膠純度高，金屬殘留少，鍵合率增加、降低游離硅羥基活性，避免拖尾現(xiàn)象發(fā)生。

2、流動(dòng)相的調(diào)節(jié)

（1） 使用離子對(duì)試劑，使形成中性離子對(duì)，增強(qiáng)堿性化合物的保留，改善堿性化合物的峰形，比如庚烷磺酸鈉、己烷磺酸銨、十二烷基磺酸鈉等。

（1） 使用“掃尾劑”，比如三乙胺、二乙胺，抑制堿性化合物的二級(jí)作用，可改善化合物峰形。

（2） 由于流動(dòng)相pH值影響峰形及保留因子、選擇性，建議堿性化合物的流動(dòng)相pH≤2.5，會(huì)有比較好的峰形。

（3） 合理選用緩沖鹽，改善化合物峰形，濃度需比樣品濃度高10倍以上，一般建議20~50mM使流動(dòng)相維持穩(wěn)定體系。

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